血小板计数(PLT)标准操作程序
血液检验SOP -12-08 19:40:01 阅读123 评论0 字号：大中小
一.目的：规范血小板计数标准操作
二.适用范围：适用于目测镜检法血小板计数
三.支持性文件：全国临床检验操作规程第三版
四.原理 ：目测镜检法
五.仪器：OLYMPUS显微镜、血球计数板
六.试剂：草酸铵法稀释液：分别溶解草酸铵1．0g及EDTA·Na20．012g，合并后加蒸馏水至100ml，混匀。
七.样本要求：静脉采血使用EDTA-K2抗凝。毛细血管采血应擦去第一滴血，以免混入组织液影响结果。标本采集完成放置5-10分钟后测定。
八.操作步骤：
1.于清洁试管中加入稀释液0．38ml。
2.准确吸取毛细血管血20μl，擦去管尖外附着血液，置于血小板稀释液内，立即充分混匀。待完全溶血后再次混匀lmin。
3.取上述均匀的血小板悬液1滴，注入计数池内，静置10～15min，使血小板下沉。
4.用高倍镜计数中央5个中方格内血小板。
5.计算
血小板数/L=5个中方格内血小板数×5×10×201×10*6/L
式中：×5 ： 5个中方格换算成1个大方格；
×10 ：1个大方格容积为0.1μl;
×201 ：血液的稀释倍数;
×10*6 ： 由μl换算成L。
九.参考范围：
(100—300)X10*9/L
十注意事项：
(1)血小板稀释液要清洁，配成后应过滤。防止微粒和细菌污染。试管及吸管也应清洁、干净。
(2)针刺应稍深，使血流通畅。拭去第一滴血后，首先采血作血小板测定，操作应迅速，防止血小板聚集和破坏。采取标本后尽快计数，以免影响结果。
(3)血液加入稀释液内要充分混匀，滴入计数池后一定要静置10一15min。室温高时注意保持计数池周围的湿度，以免水分蒸发。
(4)计数时光线要适中，不可太强，应注意有折光性的血小板和杂质、灰尘相区别。附在血细胞旁边的血小板也要注意，不要漏数。
(5)如在位相显微镜或暗视野显微镜下计数，效果更佳，计数更准确。
