人绒毛膜促性腺激素(HCG)定量测定试剂盒(化学发光法)
【生产厂家】北京源德生物医学工程有限公司
【批准文号】国药准字S0002
【剂 型】试剂盒
【规 格】96人份
【医保类型】
【国家基本药物】否
【英文名】Human Chorionic Gonadotropin(HCG) Chemiluminescence Quantitative Immunoassay Kit
【汉语拼音】Renrongmaomo Cuxingxianjisu Dingliang Cheding Shi Ji He Faguang （Huaxuefaguang）
【使用目的】
定量测定人血清或血浆中的HCG含量。
【试验原理】
人绒毛膜促性腺素(Human Chorionic Gonadotropin，HCG)是一种糖蛋白激素，测定血、尿中HCG含量可以用于早期妊娠、绒毛上皮癌、葡萄胎、滋养叶细胞瘤、宫外孕等的辅助诊断。
本品系由纯化的抗HCG 单克隆抗体包被的微孔板、酶标记HCG单克隆抗体、发光底物液(鲁米诺)和HCG 校准品及其他必要辅助试剂组成的一组试剂，采用双抗体夹心法原理检测人血清、血浆中的HCG含量。
【试剂盒组成】
◆鼠抗-HCG单抗包被板：8×12条（96人份）或8×6条（48人份）
◆HRP-鼠抗HCG单抗：红色，液体
◆HCG系列校准品：7瓶，液体。
本批校准品用HCG国家标准品513-9003校准后浓度为：0，6.0，11.0，30.0，100.0，230.0，470.0 IU/L
◆HCG质控血清：2瓶，冻干品（备选）
◆浓缩洗涤剂：2瓶，液体
◆发光液：2瓶，淡蓝色液体
◆说明书1份
◆盖板膜1片
◆发光液混合瓶（黑色）1个
◆试剂盒参数IC卡一张
【适用仪器】
北京纬晓公司生产的MPC-1型微孔板单光子计数仪或其它微孔板单光子计数仪
北京纬晓公司生产的微孔板洗板机及其它微孔板洗板机
【样本要求】
◆采血后立刻分离出血清或血浆用于分析，可使用EDTA（1.5g/l全血）、枸橼酸钠（10.9mmol/l全血）或肝素（20～30U/ml全血）作抗凝剂，如在24小时之内使用，可于2-8℃中保存，长期存放应保存在-20℃以下，并避免反复冻融。
◆高脂血症样本不影响测定，但取样时应注意准确性。
◆血中血红蛋白含量可能影响测定，严重溶血样本不能用于测定。
◆微生物污染的样本对测定结果的影响尚未确定。
【试验方法】
◆试剂准备
1 使用前试剂盒平衡到室温。
2 冻干品（如质控血清）用蒸馏水复溶后，轻摇混匀，静置15-20分钟，至冻干品完全复溶后使用。
3 用蒸馏水将浓缩洗涤液稀释20倍后使用。
4 使用前5分钟取适量发光液A与发光液B等体积混和。
◆分析过程
1 每孔加入校准品或质控血清或样品20μl，然后加入100μl酶结合物。
2将微孔板在震荡器上，震荡片刻后用板盖膜将板孔盖好，置于37℃水育箱中温育2小时。
3 吸出或倒出反应液后，加入洗涤液洗五次，洗涤液量每次每孔不少于200μl，吸出或倒出洗涤液后拍干。也可用洗板机洗涤。
4 每孔加入发光液100μl，放置10分钟后测定相对发光强度。
5 在软件支持下将各孔位按实验需要定义，并按软件提示输入IC卡信息。
6 实验过程简要说明如下表所示
单位:μl
校准品孔质控血清和样品孔
校准品20—
质控血清和样品 —20
酶结合物 100100
37℃温育2小时，吸出或倒出反应混合液后，加入洗涤液洗五次，吸出或倒出并拍干后，加入100μl发光液，10分钟后测定相对发光强度。
◆实验过程中应注意
1 任何临床样本都应作为具有传染性样品对待。
2 试剂混匀时避免起泡，并使用新吸头以避免污染。
3 在加入样本及试剂时应沿着孔壁加入，以免外溅。
4 发光液和酶标记物要避免强光的直射。
5 试剂盒不要长时间放置于室温下，应于2-8℃保存，并在有效期内使用。
6 开封后未使用的发光板条应重新封好并保存在2-8℃。
7 同一次实验不要使用不同批次的试剂。
8 测定相对发光强度应在加入发光液后10-30分钟内，测定时室温应于20-30℃之间。
9 测定样品较多时应保证每块板从加发光液到测量时，间隔时间的一致性。最好是每块板都做校准品曲线。
10 实验中校准品、质控血清和样品须同时测定。
◆质量控制
1 校准品线性回归系数不小于0.9900。
2 质控血清（选购或自制）测值在允许范围内。
同时满足上述条件则检测结果可确认。
◆测定结果的计算
用双对数回归方法来处理数据。用各校准品孔相对发光强度减去零校准品孔的相对发光强度后取对数，与对应的各校准品剂量的对数值进行线性回归，得到校准品剂量-反应曲线的回归直线。用样品孔相对发光强度减去零校准品孔相对发光强度后的对数值，可从上述线性回归直线上反推算出样品中HCG的浓度值。
◆样品分析实例
【试验方法】
◆试剂准备
1 使用前试剂盒平衡到室温。
2 冻干品（如质控血清）用蒸馏水复溶后，轻摇混匀，静置15-20分钟，至冻干品完全复溶后使用。
3 用蒸馏水将浓缩洗涤液稀释20倍后使用。
4 使用前5分钟取适量发光液A与发光液B等体积混和。
◆分析过程
1 每孔加入校准品或质控血清或样品20μl，然后加入100μl酶结合物。
2将微孔板在震荡器上，震荡片刻后用板盖膜将板孔盖好，置于37℃水育箱中温育2小时。
3 吸出或倒出反应液后，加入洗涤液洗五次，洗涤液量每次每孔不少于200μl，吸出或倒出洗涤液后拍干。也可用洗板机洗涤。
4 每孔加入发光液100μl，放置10分钟后测定相对发光强度。
5 在软件支持下将各孔位按实验需要定义，并按软件提示输入IC卡信息。
6 实验过程简要说明如下表所示
单位： μl
校准品孔
质控血清和样品孔
校准品
20
—
质控血清和样品
—
20
酶结合物
100
100
37℃温育2小时，吸出或倒出反应混合液后，加入洗涤液洗五次，吸出或倒出并拍干后，加入100μl发光液，10分钟后测定相对发光强度。
◆实验过程中应注意
1任何临床样本都应作为具有传染性样品对待。
2试剂混匀时避免起泡，并使用新吸头以避免污染。
3在加入样本及试剂时应沿着孔壁加入，以免外溅。
4发光液和酶标记物要避免强光的直射。
5试剂盒不要长时间放置于室温下，应于2-8℃保存，并在有效期内使用。
6开封后未使用的发光板条应重新封好并保存在2-8℃。
7同一次实验不要使用不同批次的试剂。
8测定相对发光强度应在加入发光液后10-30分钟内，测定时室温应于20-30℃之间。
9测定样品较多时应保证每块板从加发光液到测量时，间隔时间的一致性。最好是每块板都做校准品曲线。
10实验中校准品、质控血清和样品须同时测定。
◆质量控制
1 校准品线性回归系数不小于0.9900。
2 质控血清（选购或自制）测值在允许范围内。
同时满足上述条件则检测结果可确认。
◆测定结果的计算
用双对数回归方法来处理数据。用各校准品孔相对发光强度减去零校准品孔的相对发光强度后取对数，与对应的各校准品剂量的对数值进行线性回归，得到校准品剂量-反应曲线的回归直线。用样品孔相对发光强度减去零校准品孔相对发光强度后的对数值，可从上述线性回归直线上反推算出样品中HCG的浓度值。
◆样品分析实例
浓度
(IU/L)
RLU
平行孔1
RLU
平行孔2
RLU
平均值
浓度
(IU/L)
校准品A
0
47
46
47
校准品B
6.0
683
617
650
校准品C
11.0
1231
1192
1212
校准品D
30.0
3150
3032
3091
校准品E
100.0
11312
10334
10823
校准品F
230.0
25129
24704
24917
校准品G
470.0
41147
39555
40351
样品1
42156
41663
41910
430.0
样品2
7501
7686
7594
75.5
样品3
16531
16244
16388
161.0
【结果判定】
根据1200份血清样品测得参考正常值范围为5.0IU/L。
【对试验结果的解释】
1 各实验室应建立自己的临床正常及病理值范围，上述正常值范围仅供参考。
2 本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围，超出此范围的测定结果是通过校准品曲线外延得出的计算结果。
3 超过试剂盒测定范围的高浓度样本，如欲测定其确切结果，应稀释后测定。
【本检测方法的局限性】
1 本品可用于血清及EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝的血浆样本的测定，用于其他体液样本中HCG浓度测定的可靠性尚未得到充分确认。
2 通过其他方法得到的样品中的HCG浓度值与本品测定结果不具有直接的可比性。
3 诊断或治疗中接受过鼠单克隆抗体制剂的患者样本中会含有人抗鼠抗体（HAMA）。这些样本经利用鼠单克隆抗体的分析试剂盒检验时，所得结果会偏高。这些样本不能利用本试剂盒进行分析测定。
【产品性能指标】
◆特异性：与主要类似物的交叉反应如下
交叉反应物质交叉反应率
人促黄体生成素（LH） 小于2%
人促卵泡激素（FSH） 小于1%
促甲状腺激素(TSH)小于0.1%
◆灵敏度：本试剂盒的分析灵敏度为最低检测限不高于1.0IU/L。功能灵敏度不大于分析灵敏度。
◆HOOK效应：本试剂盒在样品浓度小于22800IU/L时不会出现HOOK效应。
◆精密性：不同的血清样品的分析内和分析间变异如下表所示
样品 测定值(IU/L) 分析内(% CV),n=10分析间(% CV), n=10
147.19 3.3 3.7
2367.2 2.8 4.6
◆准确性：回收实验（单位：IU/L）
低浓度血清 加入量) 预期回收值 测定值回收率%
0.9 6.0 6.9 7.8 113
0.9 15.015.9 16.0 100
0.9 30.030.9 31.5 102
0.9 65.065.9 66.7 101
0.9 120.0120.9 118.998
0.9 250.0250.9 238.995
0.9 400.0400.9 364.691
◆准确性：线性稀释实验（单位：IU/L）
稀释度预期值测定值回收率%
1:64 7.86 7.81 100.6
1:32 16.0515.63102.7
1:16 31.4931.25100.8
1:8 66.5962.5 106.5
1:4 118.31125 94.6
1:2 237 250 94.8
◆试剂盒可测定范围：1.0IU/L～22800IU/L。
【注意事项】
◆该
